田梦悦,刘宝京,代 飞,侯海婷,秦建华,马玉忠
2017, 40(5): 90-94.
为建立 LPS 致奶牛蹄真皮细胞炎症模型, 通过分离, 培养奶牛蹄真皮细胞, 用不同浓度的 LPS 处理蹄真
皮 细胞, 倒置 显微镜 下 观察 细胞 形态, MTT 法 检测 细胞 活力, RT-PCR 法 检测 CYP3A4, CYP1A1mRNA 的 表
达, Western blot 法检测CYP450 蛋白的表达, 并通过ELISA 法检测细胞中TNF-ɑ, IL-1β 的 含量, 来确
定 LPS 是否对细胞造成损伤. 结果表明, 随着 LPS 浓度的升高, 对蹄真皮细胞的损伤也随之升高, CYP450 蛋
白, 在 10μg / mL 时表达最明显, 10μg / mL LPS 处理48h, 对 CYP3A4, CYP1A1 mRNA
表达的抑制作用较明显, 模组TNF-ɑ 和 IL-1β 的含量极显著高于对照组 (P <0.01) 本试验表明., 10 ug / mL
LPS 作用48h 可建立可靠的蹄真皮细胞炎症模型.